六株植物乳桿菌的益生特性研究

植物乳桿菌是目前研究最廣泛的乳酸菌之一，是一種革蘭氏陽(yáng)性乳桿菌，為兼性異型發(fā)酵，最適生長(zhǎng)溫度為30～35 ℃，最適pH為6.5，必須從外界獲取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)來(lái)滿(mǎn)足自身的生長(zhǎng)和新陳代謝的需要，部分菌株能夠還原硝酸鹽，具有抑制假過(guò)氧化氫酶活性的能力[1]，常用于食品的發(fā)酵，安全性較高，益生作用明顯。研究表明，植物乳桿菌可以抑制腸道致病菌，HUANG等[2]研究表明，添加植物乳桿菌LDY 2013通過(guò)增加小鼠腸道中雙歧桿菌和乳酸桿菌的數(shù)量，降低腸桿菌等致病菌數(shù)量。萬(wàn)婧倞等[3]從柏式中喙鯨內(nèi)臟中篩選出1株植物乳桿菌HJ-S2，能夠有效降低膽固醇，降解率可達(dá)48.82%。LIU等[4]從植物乳桿菌TWK 10發(fā)酵的豆奶水提物中分離出具有生物活性的血管緊張肽轉(zhuǎn)化酶抑制劑，并鑒定出尿嘧啶和甘油組合為血管緊張肽轉(zhuǎn)化酶抑制劑之一，這表明植物乳桿菌在開(kāi)發(fā)抗高血壓產(chǎn)品中有巨大潛力。FREDIANSYAH等[5]利用植物乳桿菌FNCC 0027發(fā)酵牙買(mǎi)加櫻桃汁，檢測(cè)發(fā)酵底物中多種活性物質(zhì)，結(jié)果表明發(fā)酵后總酚含量、抗氧化活性和對(duì)糖尿病相關(guān)酶的抑制作用均有所增強(qiáng)。聯(lián)合國(guó)糧食及農(nóng)業(yè)組織/世界衛(wèi)生組織發(fā)表的《食品益生菌評(píng)價(jià)指南》指出，對(duì)胃酸的耐受性試驗(yàn)、黏附試驗(yàn)、對(duì)致病菌的抑制試驗(yàn)等體外試驗(yàn)是評(píng)價(jià)益生性微生物安全性的必需試驗(yàn)[6]。

本課題組前期從健康動(dòng)物腸道、糞便和土壤中篩選出乳酸菌，經(jīng)16S rRNA鑒定為植物乳桿菌。本研究通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)室保存的這6株植物乳桿菌的耐酸耐膽鹽能力、模擬胃腸道環(huán)境的耐受性、抑菌活性和黏附性能等益生性能進(jìn)行評(píng)價(jià)，以期為其作為益生菌株后期的工業(yè)化應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株和細(xì)胞

菌株來(lái)源于課題組自健康仔豬腸道食糜中分離并保存的植物乳桿菌(LP15-1、LP15-2、LC16-1、LP17-1、LP17-3、RS048)。金黃色葡萄球菌、大腸桿菌K88、大腸桿菌K99、鼠傷寒沙門(mén)氏菌由國(guó)家糧食和物資儲(chǔ)備局科學(xué)研究院菌種庫(kù)保存。Caco-2、IPEC-1細(xì)胞株由中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)武振龍教授課題組饋贈(zèng)。

1.1.2 試劑

胰蛋白酶、胃蛋白酶、20×磷酸緩沖鹽溶液、臺(tái)盼藍(lán)染色液、異硫氰酸熒光素酯(fluorescein isothiocyanate isomer I，F(xiàn)ITC)，北京索萊寶科技有限公司；MRS肉湯培養(yǎng)基、MRS培養(yǎng)基、LB肉湯培養(yǎng)基、豬膽鹽，北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司；瓊脂粉，北京博奧拓達(dá)科技有限公司；DMEM培養(yǎng)基、DMEM/F12培養(yǎng)基、胎牛血清、青霉素鏈霉素雙抗溶液、0.25%胰蛋白酶消化液、非必需氨基酸(nonessential amino acid，NEAA)，美國(guó)Gibco公司；二甲基亞砜，美國(guó)Sigma公司。

1.2 儀器與設(shè)備

HZQ-X100振蕩培養(yǎng)箱，哈爾濱市東聯(lián)電子技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司；SynergyH1酶標(biāo)儀，美國(guó)伯騰儀器有限公司；CO2培養(yǎng)箱、BPH-9272精密恒溫培養(yǎng)箱，上海一恒科學(xué)儀器有限公司；MLS-3781L-PC高壓蒸汽滅菌器，松下健康醫(yī)療器械株式會(huì)社；超凈工作臺(tái)，北京東聯(lián)哈爾儀器制造有限公司；微型臺(tái)式真空泵，海門(mén)市其林貝爾儀器制造有限公司；OLYMPUS CKX41倒置顯微鏡，日本OLYMPUS公司；水浴鍋，上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司；5810R臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)，艾本德中國(guó)有限公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 植物乳桿菌耐酸能力的測(cè)定

參考王祎然等[7]的方法用鹽酸配制pH分別為2.0和3.0的MRS液體培養(yǎng)基，將植物乳桿菌落從凍存管中按照1%接種量接于MRS液體培養(yǎng)基中，活化2次后，再按照1%接種量接種于不同pH(2.0、3.0)的MRS培養(yǎng)基中，置于37 ℃，150 r/min振蕩培養(yǎng)，在第0、3 h進(jìn)行活菌平板計(jì)數(shù)，存活率按公式(1)計(jì)算：

存活率

(1)

式中：n1為3 h活菌數(shù)，n2為0 h活菌數(shù)。

1.3.2 植物乳桿菌耐膽鹽能力的測(cè)定

參考王祎然等[7]的方法用豬膽鹽配制含0.1%、0.3%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))膽鹽的MRS液體培養(yǎng)基，將活化后的植物乳桿菌按照1%接種量接種于不同膽鹽濃度的MRS培養(yǎng)基中，置于37 ℃振蕩培養(yǎng)，在第0、3 h進(jìn)行活菌平板計(jì)數(shù)，存活率計(jì)算同1.3.1。

1.3.3 植物乳桿菌耐模擬胃腸道能力的測(cè)定

模擬胃液配制[8]：取1 mol/L鹽酸溶液20 mL，加入胃蛋白酶10 g，加水定容至1 000 mL，使其終質(zhì)量濃度為0.01 g/mL，0.22 μm微孔濾膜除菌，4 ℃保存待用。

模擬腸液配制[9]：取KH2PO4 6.8 g，加水溶解，用NaOH溶液將其pH調(diào)至6.8；另取胰蛋白酶10 g，加水溶解后將兩液混合，加水至1 000 mL，并用0.22 μm微孔濾膜除菌，4 ℃保存待用。

將活化好的菌液按10%接種量接種到模擬胃液，混勻后，置于37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，在第0、3 h分別取樣，進(jìn)行活菌平板計(jì)數(shù)。在模擬胃液中培養(yǎng)3 h后，按照10%接種量接種到模擬腸液，混勻后，置于37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，在第0、3、6 h分別取樣，進(jìn)行活菌平板計(jì)數(shù)。存活率計(jì)算同1.3.1。

1.3.4 植物乳桿菌致病菌抑制能力的測(cè)定

采用牛津杯法[10]測(cè)定植物乳桿菌的抑菌能力，分別取4種致病菌(金黃色葡萄球菌、鼠傷寒沙門(mén)氏菌、大腸桿菌K88、大腸桿菌K99)菌液涂布在LB培養(yǎng)基上，每個(gè)平皿中等距放置4個(gè)牛津杯，其中3個(gè)牛津杯中加入200 μL植物乳桿菌，其余1個(gè)作為對(duì)照加入200 μL的MRS液體培養(yǎng)基，將平皿正置于37 ℃培養(yǎng)箱，培養(yǎng)24 h，結(jié)束后觀察并用游標(biāo)卡尺測(cè)量抑菌圈直徑。

1.3.5 植物乳桿菌黏附性能的測(cè)定

細(xì)胞培養(yǎng)：Caco-2細(xì)胞使用含有雙抗(青霉素100 U/mL和鏈霉素100 g/mL)、10%胎牛血清(fetal bovine serum，F(xiàn)BS)和1%NEAA的DMEM培養(yǎng)基；IPEC-1細(xì)胞使用含有雙抗(青霉素 100 U/mL和鏈霉素 100 g/mL)、10%FBS的DMEM/F12培養(yǎng)基置于37 ℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每2 d換液，細(xì)胞生長(zhǎng)至融合率85%左右，用0.25%胰酶溶液消化后傳代培養(yǎng)，傳代3次后用DMEM完全培養(yǎng)基調(diào)整到5×104個(gè)/mL接種到24孔板，備用。

植物乳桿菌準(zhǔn)備：將活化2次的植物乳桿菌在室溫條件下離心后，收集菌體，用PBS重懸菌體，并調(diào)整濃度為1×109 CFU/mL，然后加入終質(zhì)量濃度為100 μg/mL的FITC溶液，37 ℃避光孵育2 h，室溫下離心，棄上清液，用PBS調(diào)整植物乳桿菌濃度到1×108 CFU/mL，備用。

植物乳桿菌的體外黏附特性測(cè)定：參考馮軍廠[11]的方法，24孔板中的細(xì)胞長(zhǎng)至單層后吸出培養(yǎng)基，用PBS洗滌，并加入無(wú)抗培養(yǎng)基，培養(yǎng)2 h后，每孔加入標(biāo)記的植物乳桿菌菌懸液，避光培養(yǎng)2 h。培養(yǎng)結(jié)束后，吸出培養(yǎng)基和菌懸液，用PBS洗滌未黏附的植物乳桿菌，再加胰酶待細(xì)胞消化后，加入PBS。將24孔板中的細(xì)胞吹打混勻，并加入黑色96孔板，測(cè)其熒光值為A1；再取相同量的植物乳桿菌菌懸液，加入胰酶和PBS溶液，混勻后加入黑色96孔板，測(cè)其熒光值為A2；取等量胰酶和PBS溶液混勻后加入黑色96孔板，測(cè)其熒光值為A0，作為空白對(duì)照，各株植物乳桿菌對(duì)細(xì)胞的黏附率按照公式(2)計(jì)算：

黏附率

(2)

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

所有試驗(yàn)均重復(fù)3次，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用SAS 9.0軟件中單因素方差分析(one-way ANOVA)進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，P<0.05表示差異顯著。若各組間差異顯著，則采用Student-Newman-Keuls多重比較方法檢驗(yàn)組間差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 植物乳桿菌耐酸能力

植物乳桿菌經(jīng)過(guò)胃腸道，只有抵過(guò)胃腸道的強(qiáng)酸和高膽鹽脅迫，在腸道中存活下來(lái)，才能在體內(nèi)發(fā)揮益生作用[12]。人胃液中胃酸的主要成分為鹽酸，其pH通常在3.0，空腹時(shí)可達(dá)到2.0左右，甚至更低。因此，只有少數(shù)耐酸能力較好的植物乳桿菌能夠通過(guò)胃酸屏障，以活菌形式到達(dá)腸道并發(fā)揮作用。本試驗(yàn)用不同鹽酸對(duì)6株植物乳桿菌生長(zhǎng)環(huán)境的pH進(jìn)行調(diào)節(jié)，觀察其在pH 2.0和pH 3.0環(huán)境下培養(yǎng)3 h后的存活情況，結(jié)果如表1所示。

表1 植物乳桿菌在不同pH下的活菌數(shù)和存活率(n=3)
Table 1 Viable count and survival rate of Lactobacillus plantarum under different pH condition(n=3)

注：ND表示活菌數(shù)<3 lgCFU/mL；數(shù)值表示平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(n=3)；同列數(shù)值肩標(biāo)字母不同表示顯著差異(P<0.05)(下同)

如表1所示，pH 3.0條件培養(yǎng)3 h后，6株植物乳桿菌的存活率為80.24%～100.74%，活菌數(shù)均高于1×107 CFU/mL，這表明這6株植物乳桿菌都具有一定的耐酸能力。其中LP17-1和RS048兩株菌的存活率高于100%表明該菌能在pH 3.0的環(huán)境中繼續(xù)生長(zhǎng)，導(dǎo)致其活菌數(shù)增加。除此之外的4株菌活菌數(shù)均下降，則表明低pH值能抑制植物乳桿菌的生長(zhǎng)。pH 2.0條件培養(yǎng)3 h后，6株植物乳桿菌的活菌數(shù)均下降，其中3株菌的活菌數(shù)<1×103 CFU/mL，表明pH 2.0對(duì)植物乳桿菌生長(zhǎng)抑制能力更強(qiáng)，另外3株菌中LP15-1的存活率為87.96%，顯著高于LP15-2和LC16-1(P<0.05)。

2.2 植物乳桿菌耐膽鹽能力

植物乳桿菌在人體中發(fā)揮益生功能的重要前提是適應(yīng)小腸中的膽鹽脅迫，人體小腸中膽鹽含量為0.03%～0.3%[13]。本試驗(yàn)研究了6株植物乳桿菌在膽鹽質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%和0.3%的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，觀察其培養(yǎng)3 h后的存活情況，結(jié)果如表2所示。

表2 植物乳桿菌在不同濃度膽鹽下的活菌數(shù)和存活率(n=3)
Table 2 Viable count and survival rate of Lactobacillus plantarum under culture condition with different concentration of bile salt(n=3)

如表2所示，6株植物乳桿菌在0.1%膽鹽培養(yǎng)3 h后，活菌數(shù)都在6lgCFU/mL以上，除LC16-1外，其余5株菌的存活率為96.36%～102.47%，說(shuō)明6株菌都具有較好的膽鹽耐受性。在膽鹽質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.3%的條件下培養(yǎng)3 h后，6株菌的存活率均有所下降，但LP15-1的存活率為100.03%，顯著高于其他5株，LC16-1和LP17-1活菌數(shù)<3lgCFU/mL。由此可知，LP15-1、LP15-2、LP17-3、RS048對(duì)膽鹽的耐受能力比較優(yōu)良，其中，LP15-1在膽鹽質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%和0.3%的條件下，存活率分別為102.47%、100.03%，可能是因?yàn)樵摼褪苣扄}能力較強(qiáng)，在強(qiáng)膽鹽條件下仍然可以生長(zhǎng)。

2.3 植物乳桿菌耐受模擬胃腸液能力

胃腸道中的液體，除了較低的pH值和較高濃度的膽鹽外，還含有胃蛋白酶和胰蛋白酶[14]?！吨袊?guó)藥典》將人工胃液配制定為取9.5%～10.5%的稀鹽酸16.4 mL，加水稀釋再加入胃蛋白酶10 g，搖勻后，加水至1 000 mL即可。人工腸液配制定為取磷酸二氫鉀6.8 g，加水溶解，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH為6.8，取胰蛋白酶10 g，加水溶解，將兩液混合后加水定容至1 000 mL即可。研究表明，大多數(shù)乳酸菌在pH 1.5 的環(huán)境中，1 h后將會(huì)死亡，而在pH 2.5～4.0的環(huán)境中，培養(yǎng)3 h仍有較高的存活率[15-16]。本研究將分離得到的6株植物乳桿菌接種于含有消化酶、pH分別為2.0和3.0的模擬胃液中，進(jìn)一步考察其存活率。

表3 植物乳桿菌在不同模擬胃腸液中的存活率(n=3) 單位：%

Table 3 Survival rate of Lactobacillus plantarum under different simulated gastrointestinal fluid(n=3)

由表3可知，本次實(shí)驗(yàn)的6株植物乳桿菌在不同pH的模擬胃液中，3 h存活率均高于97%。其中LP15-1存活率最高，在pH 3.0和pH 2.0的模擬胃液中的存活率分別為104.84%和101.13%。

乳酸菌經(jīng)過(guò)胃部的消化后，還需要在腸道中定殖，才能有效發(fā)揮其益生作用[17]。在模擬腸液中，6株植物乳桿菌都表現(xiàn)出較好的耐受腸液能力。除LP15-2和LP17-3以外，3 h內(nèi)菌株LP15-1、LC16-1、LP17-1、RS048的存活率均能達(dá)到100%以上。郝露露等[18]對(duì)植物乳桿菌B14、C24、32E在模擬腸道的存活率的研究中，也發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)3 h后其存活率能夠達(dá)到100%以上，可能是因?yàn)樵囼?yàn)菌株為處在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的旺盛菌株。在模擬腸液中培養(yǎng)6 h，植物乳桿菌的存活率稍有降低，但除LP15-2、LP17-3和RS048外，仍都能夠達(dá)到100%以上。因此，本試驗(yàn)所用的6株植物乳桿菌都具有較強(qiáng)的耐受模擬胃腸液的能力，能夠在胃腸道中有效的發(fā)揮益生作用。

2.4 植物乳桿菌抑菌能力

大量研究表明，乳酸菌在增殖過(guò)程中產(chǎn)生的如乳酸、乙酸、細(xì)菌素等代謝產(chǎn)物對(duì)腸道病原菌具有抑制作用[19]。CIZEIKIENE等[20]發(fā)現(xiàn)乳酸乳桿菌屬和雙歧桿菌屬菌株對(duì)大腸桿菌均有抑菌作用，但不同的菌株抑菌能力有差別。YANG等[21]的研究表明乳酸乳球菌能夠有效抑制金黃色葡萄球菌。本研究發(fā)現(xiàn)植物乳桿菌LP15-1、LP15-2、LC16-1、LP17-1、LP17-3、RS048對(duì)指示菌金黃色葡萄球菌、鼠傷寒沙門(mén)氏菌、大腸桿菌K88、大腸桿菌K99均有抑制作用。由表4可知，6株植物乳桿菌對(duì)鼠傷寒沙門(mén)氏菌的抑制能力比其他3株指示菌強(qiáng)，其中LC16-1對(duì)鼠傷寒沙門(mén)氏菌的抑制效果最好，抑菌圈直徑達(dá)29.97 mm。植物乳桿菌LP15-1、LC16-1、LP17-1對(duì)大腸桿菌的抑制能力顯著高于LP15-2、LP17-3和RS048(P<0.05)，但是6株植物乳桿菌對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌K99的抑制效果的差異不顯著(P>0.05)。

表4 植物乳桿菌對(duì)4種指示菌的抑菌圈平均直徑(n=3) 單位：mm

Table 4 Average diameter of inhibition zone of Lactobacillus plantarum to four indicator pernicious bacteria(n=3)

注：同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)字母不同表示差異顯著(P<0.05)

2.5 植物乳桿菌黏附能力

乳酸菌想要在宿主腸道中持久發(fā)揮生理功能的條件之一是能夠在宿主腸道黏膜上皮細(xì)胞中黏附并定殖，在腸道某個(gè)部位形成穩(wěn)定的菌群后才能發(fā)揮作用[22]，而黏附則被認(rèn)為是定殖的關(guān)鍵一步[23]。目前，體外細(xì)胞黏附模型作為評(píng)價(jià)乳酸菌黏附性的一種最廣泛的手段，被研究者們普遍使用[24]。Caco-2為結(jié)腸癌細(xì)胞，其優(yōu)點(diǎn)是它們?cè)隗w外能夠表現(xiàn)出與成熟腸道上皮細(xì)胞相似的形態(tài)和功能，因此經(jīng)常作為評(píng)價(jià)益生菌黏附能力的體外模型。IPEC-1為豬空腸上皮細(xì)胞，用IPEC-1作為模型，能夠模擬乳酸菌對(duì)小腸上皮的黏附特性。熒光標(biāo)記法類(lèi)似于放射性同位素，該方法常用FITC作為標(biāo)志物，操作較為簡(jiǎn)便，因此，被較多研究者廣泛用于測(cè)定乳酸菌的黏附性。

如圖1-A所示，試驗(yàn)中的植物乳桿菌基本都能夠黏附于Caco-2細(xì)胞表面，但表現(xiàn)出的黏附能力有較大差異。LP15-2的黏附率最高，其次是LP15-1，這兩株植物乳桿菌的黏附效果顯著高于其他幾株(P<0.05)。LP17-1黏附率最低。與其他研究[11]相似，本試驗(yàn)的不同植物乳桿菌對(duì)Caco-2細(xì)胞的黏附能力具有較大差異，這種現(xiàn)象可能和菌株的表面特征相關(guān)，因此，對(duì)黏附能力較好的菌株值得進(jìn)一步的研究。

從圖1-B可以看出，試驗(yàn)中的幾株植物乳桿菌對(duì)IPEC-1的黏附能力均低于對(duì)Caco-2的黏附能力。類(lèi)似的是，不同菌株對(duì)IPEC-1的黏附能力也表現(xiàn)出較大的差異，其中LP15-2的黏附率最高，顯著高于其他5株(P<0.05)。對(duì)Caco-2細(xì)胞表現(xiàn)出較好的黏附能力的LP15-1對(duì)IPEC-1細(xì)胞表現(xiàn)出明顯的下降，其黏附率顯著低于LP15-2(P<0.05)，而LP17-1、LP17-3和RS048的黏附率較低，均<0.5%，黏附能力較弱。

A-植物乳桿菌對(duì)Caco-2細(xì)胞的黏附能力；B-植物乳桿菌對(duì) IPEC-1細(xì)胞的黏附能力
圖1 植物乳桿菌對(duì)腸道上皮細(xì)胞的黏附能力(n=3)
Fig.1 Adhesion ability of Lactobacillus plantarum to intestinal epithelial cells(n=3) 注：數(shù)值表示平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(n=3)；不同字母表示差異顯著(P<0.05)

本試驗(yàn)采用體外細(xì)胞模型模擬腸道上皮細(xì)胞，用熒光染料標(biāo)記來(lái)檢測(cè)植物乳桿菌的黏附效果。乳酸菌能黏附在黏膜表面過(guò)程較為復(fù)雜，可能與菌株的胞外多糖、表面蛋白和脂肪酸等有關(guān)。從本研究結(jié)果可以看出不同菌株在Caco-2細(xì)胞表現(xiàn)出較高的黏附性能，可能是乳酸菌主要在后腸段起黏附作用。YU等[25]研究表明，瘤胃乳桿菌菌株GRL1172幾乎無(wú)法黏附IPEC-1細(xì)胞，對(duì)Caco-2細(xì)胞有較弱的黏附能力，這與我們得到的結(jié)論相似。同時(shí)乳酸菌的黏附率也與外界環(huán)境有關(guān)，GREENE等[26]研究顯示，低pH值能夠顯著提升乳酸桿菌對(duì)Caco-2的黏附能力，劉東方等[27]通過(guò)研究菌株的表面疏水性發(fā)現(xiàn)，表面疏水性較高其黏附性能也相對(duì)較高，另外蔣建軍等[28]研究發(fā)現(xiàn)Ca2+濃度增加，可以明顯增加乳酸菌的黏附和定殖能力。

3 結(jié)論

從不同來(lái)源中分離得到的6株植物乳桿菌在耐酸耐膽鹽能力中有所不同，其中植物乳桿菌LP15-1、LP15-2、LC16-1的耐酸能力較強(qiáng)，在pH 2.0的酸環(huán)境中孵育3 h存活率均在43%以上；植物乳桿菌LP15-1、LP15-2、LP17-3和RS048的耐膽鹽能力較好，在0.3%膽鹽培養(yǎng)基中孵育3 h存活率均在72%以上；6株植物乳桿菌均表現(xiàn)出較好的模擬胃腸道耐受性，存活率均高于95%。在抑菌試驗(yàn)中，6株植物乳桿菌對(duì)4種常見(jiàn)的致病菌的抑制能力較好。對(duì)Caco-2和IPEC-1細(xì)胞的黏附能力差異較大。

對(duì)研究結(jié)果比較發(fā)現(xiàn)，植物乳桿菌LP15-1具有良好的耐強(qiáng)酸和耐膽鹽能力，在pH 2.0的酸環(huán)境中孵育3 h存活率87.96%，在0.3%膽鹽培養(yǎng)基中孵育3 h 存活率100.03%；且具有較好的模擬胃腸道耐受能力和抑菌能力，對(duì)最常用體外細(xì)胞模型Caco-2細(xì)胞的黏附效果較好，其潛在益生特性有待進(jìn)一步研究，同時(shí)植物乳桿菌LP15-1可作為益生菌在實(shí)際生產(chǎn)、功能性食品的開(kāi)發(fā)、動(dòng)物飼料中有進(jìn)一步的應(yīng)用。其他5株植物乳桿菌的益生特性也各有側(cè)重，可根據(jù)實(shí)際應(yīng)用中的不同需求對(duì)益生特性的優(yōu)勢(shì)方面更深一步的探究，以求發(fā)揮其最大作用。